Ttitulo: Las pantallas CRISPR de todo el genoma revelan la letalidad sintética de la deficiencia de RNASEH2 y la inhibición de ATR

Tipo de celulas madre: celulas madre malignas mesenquimales

método de obteción/eliminación: Monoterapia anti-CSC dirigida a cascadas de señalización WNT

• la señalización WNT canónica a través de los receptores Frizzled  y LRP5/6  es traducida por las cascadas de señalización WNT/ B-catenina  y WNT/STOP
• la señalización WNT no canónica a través de FZD y/o ROR1/ROR2/RYK Los receptores son transducidos por las cascadas de señalización WNT/PCP (polaridad de células planas), WNT/RTK (receptor de tirosina quinasa) y WNT/Ca2+.

• FÁRMACOS UTILIZADOS:
• fármacos dirigidos a ligandos/receptores
• tankirasa (TNKS) inhibidores que reprimen WNT/β-catenina
• inhibidores de puercoespín (PORCN)
• inhibidores de β-catenina

via de administración: via parenteral

Resultados a corto plazo: las células madre cancerosas representen sólo una pequeña proporción del tumor completo, destruirlas puede tener poco impacto a corto plazo en el tamaño del tumor completo.

Resultados a largo  plazo: a largo plazo se puede esperar que el tumor se agote y marchite porque ha perdido la capacidad de auto-renovarse. En este sentido, puede ser crítico combinar la terapia dirigida hacia las células madre cancerosas con agentes convencionales que destruyan el tumor.

Bibliografía:

1. Katoh M. Canonical and non-canonical WNT signaling in cancer stem cells and their niches: Cellular heterogeneity, omics reprogramming, targeted therapy and tumor plasticity (Review). Int J Oncol [Internet]. 2017;51(5):1357–69. Disponible en: http://dx.doi.org/10.3892/ijo.2017.4129 referencia principal
2. Angosto MC. CÉLULAS MADRE Y CÁNCER [Internet]. Radoctores.es. [citado el 8 de agosto de 2022]. Disponible en: https://www.radoctores.es/doc/1V13N1-cascales-celulasmadrecancer.pdf  referencia guía

El término TRAMP (Transgenic adenocarcinoma of the Mouse Prostate) ha estado presente en una amplia variedad de estudios para designar a un raton especifico modificado geneticamente.Este modelo se asemeja a las características del cáncer de próstata, se diseñaron ratones TRAMP Knockout utilizando el promotor mínimo de probasina de rata (−426/+28) para apuntar a la expresión grande del virus T SV40 y las oncoproteínas pequeñas t, solo en el epitelio prostático, inactivando la actividad supresora de tumores p53 y Rb en ​​la próstata. Como resultado, este modelo es capaz de desarrollar no solo CaP progresivo, sino también independencia androgénica y diseminación metastásica (1).

Un ejemplo de ADN recombinante natural son las bacterias las cuales realizan su transferencia genetica mediante tres tipos de mecanismos. La transformación, la conjugación y la transducción  (1). 

Por otro lado  se ha venido utilizando como terapia para el cáncer de próstata las vacunas  de Alfavirus (virus de ARN monocatenario),los cuales son vectores virales capaces de integrarse en las células humanas y expresar sus genes de un modo eficaz,lo que se hace es  eliminar las regiones del genoma viral necesarias para su replicación y patogénesis y reemplazadas por aquellos genes terapéuticos que deseemos transferir (2).

Titulo:Alphaviruses in Cancer Therapy

Objetivo:prevención y terapeútico

Genes:genes de la proteína no estructural (nsP), el promotor subgenómico 26S, el gen de interés (GoI) y la señal poli A.

Enzimas de restricción: no describe

Enzima Ligasa: Ligasa

Vector del virus:  virus de la encefalitis equina venezolana (EEV)

- El vector auxiliar contiene el promotor subgenómico, los genes de la proteína estructural (C-p62-6K-E1) y la señal poli A

Celula receptora:células de mamífero tales como células BHK-21

 -La polimerasa de ARN SP6 se ​​usa para in vitrotranscripción del genoma de ARN de alfavirus de longitud completa,

Método de inserción del gen:  transfección- mediante electroporación 

Método de identificacíón de clones:

 inoculación en animales

Las partículas de VEE que expresan el antígeno de membrana específico de la próstata (PSMA) indujeron respuestas inmunitarias específicas de PSMA sólidas en ratones BALB/c y C57BL/6

-las respuestas inmunitarias se caracterizaron por citoquinas Th-1, potente actividad CTL y anticuerpos IgG2a/IgG2b ,por lo que se utilizo pruebas de serologia.

Para las Neoplasias mieloides se recomienda el uso de FISH, una técnia que utiliza sondas de ADN especificas y detecta fusiones de genes recurrentes que involucran PDGFRA, PDGFRB, FGFR1, PCM1-JAK2.

Primero se toma la muestra de sangre periférica,después se realiza un cultivo de 1-2  días con forbol 12-miristato 13-acetato y se añade colchicina al cultivo para impedir la formación del uso mitótico.Finalmente se añade solucion salina para lisis celular, se realiza la técnica FISH en donde se pintaran los cromosomas con fluorocromo,esta técnica analiza el genoma completo y  permite la identificación de la evolución clonal y la presencia de múltiples clones independientes.

Bibliografía: 

Para encontrar una cura que pueda erradicar el reservorio latente del VIH , se debe poder cuantificar el virus persistente,actuamente se esta utilizando la PCR digital ya que es la unica que permite la cuantificación de objetivos absolutos. la plataforma de PCR digital  QX200 ddPCR de Bio-Rad es la más utilizada en la investigación del VIH,aqui se utiliza  la química de emulsión de agua en aceite para crear particiones que seran amplificadas. La fase acuosa que consta de cebadores, sonda Taqman y supermezcla, muestra y aceite mineral se carga en un soporte diseñado específicamente,estos datos se analizan utilizando estadísticas de Poisson para determinar la concentración de la plantilla de ADN

Titulo:PCR digital como herramienta para medir la persistencia del VIH

Objetivo:Diagnóstico y tratamiento

Tipo de muestra :sangre (suero sanguíneo)

Extracción del AN: se utilizo la plataforma digital QX200 ddPCR de Bio-Rad

Tipo  de ácido nucléico:ARN retroviral

Genes amplificados :gen GAG,gen POL,gen ENV

Tipo de PCR: PCR digital de cuantificación absoluta , la cual consta de  cuatro  pasos :preparación de la  muestra,división o distribución,PCR, analisis de resultados.

Bibliografía:

Las aflotoxinas son un tipo de micotoxinas producidas por cepas toxigénicas de hongos, principalmente Aspergillus flavus y Aspergillus parasiticus,estas se encuentan en alimentos como maíz, arroz, maní y otros, que han tenido un mal manejo postcosecha. La aflatoxina B1 (AFB1) es el factor con mayor capacidad de provocar o acelerar el cáncer,  Las modificaciones genéticas comienzan en el hígado a través del AFB1 biomórfico, el activo AFB1-exo-8.9-Epoxy, que interactúa con el ADN para formar aductos de AFB1-DNA. Estos aductos inducen una mutación en el codón 249, mediada por una transversión de G-T en el gen supresor de tumores p53 , que causa carcinoma hepatocelular.

Bibliografía:

1. Ferreira RG, Cardoso MV, de Souza Furtado KM, Espíndola KMM, Amorim RP, Monteiro MC. Epigenetic alterations caused by aflatoxin b1: a public health risk in the induction of hepatocellular carcinoma. Transl Res [Internet]. 2019 [citado el 28 de junio de 2022];204:51–71. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30304666/
2. Marchese S, Polo A, Ariano A, Velotto S, Costantini S, Severino L. Aflatoxin B1 and M1: Biological properties and their involvement in cancer development. Toxins (Basel) [Internet]. 2018 [citado el 28 de junio de 2022];10(6):214. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29794965/