Para encontrar una cura que pueda erradicar el reservorio latente del VIH , se debe poder cuantificar el virus persistente,actuamente se esta utilizando la PCR digital ya que es la unica que permite la cuantificación de objetivos absolutos. la plataforma de PCR digital QX200 ddPCR de Bio-Rad es la más utilizada en la investigación del VIH,aqui se utiliza la química de emulsión de agua en aceite para crear particiones que seran amplificadas. La fase acuosa que consta de cebadores, sonda Taqman y supermezcla, muestra y aceite mineral se carga en un soporte diseñado específicamente,estos datos se analizan utilizando estadísticas de Poisson para determinar la concentración de la plantilla de ADN
Titulo:PCR digital como herramienta para medir la persistencia del VIH
Objetivo:Diagnóstico y tratamiento
Tipo de muestra :sangre (suero sanguíneo)
Extracción del AN: se utilizo la plataforma digital QX200 ddPCR de Bio-Rad
Tipo de ácido nucléico:ARN retroviral
Genes amplificados :gen GAG,gen POL,gen ENV
Tipo de PCR: PCR digital de cuantificación absoluta , la cual consta de cuatro pasos :preparación de la muestra,división o distribución,PCR, analisis de resultados.
Bibliografía:
- Rutsaert S, Bosman K, Trypsteen W, Nijhuis M, Vandekerckhove L. Digital PCR as a tool to measure HIV persistence. Retrovirology [Internet]. 2018 [citado el 11 de julio de 2022];15(1). Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29378600/
- Droplet Digital PCR (ddPCR) technology [Internet]. Bio-Rad Laboratories. [citado el 11 de julio de 2022]. Disponible en: https://www.bio-rad.com/es-ec/life-science/learning-center/introduction-to-digital-pcr/what-is-droplet-digital-pcr?ID=MDV31M4VY
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